Лиофильно высушенный.
Tos-Gly-Pro-Arg-pNA это короткий синтетический пептид, соединенный с химической меткой. Он является одним из самых популярных хромогенных субстратов для селективного определения активности тромбина в научных исследованиях и клинической диагностике.
Для него характерны:
- Высокая специфичность: последовательность аминокислот подобрана так, что другие протеазы (плазмин, фактор Ха) расщепляют его значительно медленнее, чем тромбин.
- Простота детекции: реакция регистрируется на стандартных спектрофотометрах или планшетных ридерах при длине волны 405 нм.
Принцип работы:
тромбин распознает аминокислотную последовательность Gly-Pro-Arg и расщепляет связь между аргинином (Arg) и пара-нитроанилином (pNA). Свободный pNA окрашивает раствор в желтый цвет, а скорость накопления окраски прямо пропорциональна активности фермента.
Основные направления применения Tos-Gly-Pro-Arg-pNA:
- Тестирование и скрининг новых антикоагулянтов, например, прямых ингибиторов тромбина. Также субстрат используют для кинетического анализа: точного определения типа ингибирования (конкурентное/неконкурентное) и расчета константы ингибирования по методу Лайнуивера-Бёрка.
- Тесты на генерацию тромбина.
- Оценка активности биоматериалов при помощи тестов на гемосовместимость: полимеры инкубируют с плазмой крови, после чего с помощью Tos-Gly-Pro-Arg-pNA измеряют, насколько сильно материал активирует внутренний или внешний путь свертывания (по количеству сгенерированного тромбина).
- Контроль качества и стандартизация: производство гемостатиков и очистка белков (в биохимии с его помощью контролируют выход и чистоту тромбина на этапах хроматографического выделения из плазмы).
