Реахром-гепарин

Реахром-Гепарин (ГП-1)                                      

Инструкция                                          Регистрационное удостоверение

Набор реагентов для определения анти-Ха активности гепарина оптическим методом

Набор предназначен для мониторинга гепаринотерапии путем определения анти-Ха активности гепарина (как нефракционированного, так и низкомолекулярного) в плазме крови пациентов с применением хромогенного субстрата.

Принцип метода:
Метод определения активности гепарина основан на способности комплекса АТ III-гепарин нейтрализовать активированный фактор Ха. Активность гепарина определяют в плазме, добавляя к ней избыток AT III и фактора Xa. При этом происходит ингибирование фактора Xa комплексом АТ III-гепарин пропорционально количеству гепарина в плазме. Оставшееся количество фактора Xa катализирует отщепление пара-нитроанилина (рNА) от синтетического хромогенного субстрата. Абсорбция свободного pNA, определяемая при длине волны 405 нм, обратно пропорциональна активности гепарина в плазме.
Процесс идет по следующей схеме:

АТ III (избыток) + гепарин →АТ III-гепарин.

АТ III-гепарин + Xa (избыток)→АТ III-гепарин-Xa+Xa (остаток).

Субстрат-рNA + Xa (остаток) ⇒Пептид + рNA.

Измеряют оптическую плотность образца против кюветы сравнения на спектрофотометре (ФЭКе или любом другом оптическом анализаторе) при длине волны 405 нм.

Калибровочный график. Для построения калибровочного графика используют плазмы-калибраторы с известными активностями низкомолекулярного гепарина (поставляются дополнительно, не входят в состав набора).

На оси ординат (Y) по линейной шкале откладывают величины оптической плотности, полученные для каждой плазмы-калибратора, а на оси абсцисс (Х) по линейной шкале о—активность гепарина в анти-Xa единицах в мл плазмы. Калибровочный график линеен в интервале активности гепарина от 0 до 1.0 анти-Xa ед/мл. Используя калибровочный график и значение оптической плотности исследуемого образца определяют активность гепарина в анти-Xa единицах.

Состав набора:
•    Антитромбин III, лиофильно высушенный (1,0 мл) – 2 флакона;

•    Фактор Xa, лиофильно высушенный (2,0 мл) – 2 флакона;

•    Хромогенный субстрат, лиофильно высушенный (2,0 мл) – 2 флакона.

•    Буфер концентрированный (5,0 мл) – 1 флакон;

•    Плазмы-калибраторы (1,0 мл) – 3 флакона;

•    Плазмы контрольные (1,0 мл) – 2 флакона.

Набор предназначен для проведения 20-100 определений.

Интерпретация результатов:

При проведении гепаринотерапии терапевтическая область содержания гепарина в плазме пациента составляет 0,3-0,7 антиXa ед/мл, а профилактическая область 0,1-0,3 антиXa ед/мл.